Являлся создателем и носителем образа Мужика из «Деревни Дураков», не менее запоминающиеся и другие образы Сергея — Неудачник из рубрики «Бар Каламбур», Дранкель из рубрики «Железный капут», Миссис Бурпул из рубрики «Крутое пике» и ряд других персонажей.

Также в 1991 — 1995 годах снимался в юмористической программе «Маски-шоу».

Являлся звукорежиссером многих фильмов и программ, среди которых: «Голые и смешные», «Приколисты», «Дружная семейка» и др.

Для многих его бессмертный образ Мужика из Деревни дураков стал символом беззаботного детства. А сам Сергей Игоревич внёс огромный вклад в отечественное телевидение, создав звуковое оформление множеству юмористических программ.

Причина смерти Гладкова не названа.